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发布时间:2021-11-11 17:04:33
mian疫组化检测
各组小鼠shen脏α-***a表达差异
mian疫组化技术是一种综合定性、***和定量;形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。在原位检测出病原的同时,还能观察到***病变与该病原的关系,确认受染细胞类型,从而有助于了解***的发病机理和病理过程。
mian疫酶组化技术是通过共价键将酶连接在抗ti上,制成酶标抗ti,再借酶对底物的特异催化作用,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,于普通显微镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的***,根据酶标记的部位可将其分为直接法(一步法)、间接法(二步法)、桥联法(多步法)等,用于标记的抗ti可以是用mian疫动物制备的多ke隆或特异性单ke隆抗ti,***好是特异性强的高xiao价的单ke隆抗ti。直接法是将酶直接标记在第yi抗ti上,间接法是将酶标记在第二抗ti上,检测***细胞内的特定抗原物质。目前通常选用mian疫酶组化间接染色法。***、细胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用PAS法来显示,其化学基础是利用guo碘酸的氧化作用,打开碳链形成醛,生成的醛基与Schiff***中的无色品红反应形成紫红色化合物。
面对着色深浅不一的组化切片用肉眼观察的结果只能是定性的,不准确的。使用Image-pro-plus图像分析软件对切片拍摄的照片比较累积光密度(IOD)值比肉眼观测更jing确。通过比较实验各组IOD值,我们可以为您提供半定量的数据分析。
TTC染色是TTC和活细bao线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成红色的甲月赞,用来表示细胞的活力。配制多为2%,染色要避光,37度条件下,它是评价脑缺血损伤常用的指标。
TTC(2,3,5—氯化三苯ji四氮唑)是脂溶性光敏感复合物,1894年刚开始合成用来检测种子的生存能力,1958年开始用来染色检测哺乳动物***的缺血梗塞。它是呼吸链中吡定—核苷结构酶系统的质子受体,与正常***中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血***内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。病理以胃窦部病变为主,腺体萎缩使胃黏膜变薄,但黏膜肌层相对增厚,大量炎性细胞浸润,与临床患者的胆汁反流性慢性萎缩型有较相似之处。
TTC可以被活细bao中的具有还原活性的酶(好像主要是琥珀酸脱氢酶)还原生成粉红色的还原产物,所以活组zhi部分呈现粉红色,而si亡的细胞的还原酶的活力已经消失,因此TTC不能被还原,所以si亡的***呈现白色。
普鲁士蓝染色(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁qing化钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞内会间质内,主要显示三价铁盐。该染色方法可用于模型,用于显示小球病变中糖原沉积,基底膜增厚。Perls 普鲁士蓝是非常经典的***化学反应,是显示***内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其染色原理为:亚铁qing化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁qing化钾反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁qing化物普鲁士蓝,所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁qing化物是一种很稳定的化合物,在反应后可用红色染色剂进行复染,如核固红、伊红、中性红等。
Perls stain 常用于显示局部***内各种chu血xing病变,常见于吞噬细胞内。使用Image-pro-plus图像分析软件对切片拍摄的照片比较累积光密度(IOD)值比肉眼观测更jing确。在判断含铁血黄素沉积时,用Perls 反应可以得到证实,该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。
透射电子显微镜(Tran***ission Electron Microscope,TEM)是使用***为广泛的一类电镜。Perlsstain常用于显示局部***内各种chu血xing病变,常见于吞噬细胞内。通过发射电子束从而穿过超薄的样品,同时与样本相互作用,既而形成图像。透射电镜具有分辨率高和放大倍数高的优点。其分辨率为0.1-0.2nm,放大倍数为几万到几十万倍。目前透射电镜已经广泛的应用到***zheng研究,病毒学研究,微生物学,细胞学研究等生物领域。
透射电镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像,投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。根据团队发展需要,***科研外包业务自2020年以“英瀚斯”品牌***运营。电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射。散射角的大小与样品的密度、厚度相关,因此可以形成明暗不同的影像。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,必须制备超薄切片(通常为50-100 nm)。要在机体si亡后的数分钟内取材,***块要小(1mm3以内),常用戊er醛和锇suan双重固定,包埋介质包埋,用超薄切片机切成薄片,再经醋酸铀和柠檬酸铅等进行电子染色。
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